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介绍下近年来细胞破壁机几种破壁的方法

日期:2021-4-16   浏览: 次

不同于普通榨汁机,“破壁”是指(zhi)击破植(zhi)物细胞(bao)(bao)壁。在瞬间超高转速(su)的(de)帮助(zhu)下(xia),可以击破细胞(bao)(bao)壁,使(shi)水分及营养能更好地保持活性,大大提高吸收率(lv)。因此(ci)好的(de)细胞破壁机必(bi)备的(de)两大要(yao)素:电(dian)机要(yao)快,刀锋(feng)要(yao)能击(ji)破细胞壁!
随(sui)着重(zhong)组DNA技术(shu)得(de)(de)到广泛应用以来(lai),生(sheng)物(wu)技术(shu)发生(sheng)了质(zhi)(zhi)(zhi)的(de)飞跃。很(hen)多基因工(gong)程产(chan)物(wu)都是(shi)胞内(nei)物(wu)质(zhi)(zhi)(zhi),必须将(jiang)细(xi)胞破(po)壁(bi),使产(chan)物(wu)得(de)(de)以释放,才能进一步提(ti)取(qu),因此细(xi)胞破(po)碎(sui)是(shi)提(ti)取(qu)胞内(nei)产(chan)物(wu)的(de)关键步骤,破(po)碎(sui)方法的(de)得(de)(de)当与否,直(zhi)接影响到所提(ti)取(qu)产(chan)品的(de)产(chan)量(liang)、质(zhi)(zhi)(zhi)量(liang)和(he)生(sheng)产(chan)成本。现将(jiang)近年来(lai)常用的(de)几种细(xi)胞破(po)壁(bi)方法介绍一下(xia)。 
1. 高(gao)压匀浆法 
设备是(shi)高压(ya)匀(yun)浆器,它由(you)高压(ya)泵(beng)和匀(yun)浆间组成,其破碎机理:细(xi)胞在一系列过程中经历了高速(su)造(zao)成的剪刀,碰撞以及由(you)高压(ya)到常压(ya)的变(bian)化(hua)从而造(zao)成细(xi)胞的破碎。 
存在的(de)问(wen)题;较易造成堵塞(sai)的(de)团(tuan)状或丝状真菌(jun),较小的(de)革(ge)兰氏阳性(xing)首以及有些亚细(xi)胞器,质(zhi)地(di)坚硬(ying),易损伤匀浆阀(fa),也不适(shi)合用该(gai)法处理。 
2. 高速珠(zhu)磨法 
设备是珠(zhu)后机,其(qi)破碎机下:微生(sheng)物细(xi)胞(bao)悬浮(fu)液(ye)与极细(xi)的研磨剂在(zai)(zai)搅拌浆作(zuo)用下充分(fen)混合,珠(zhu)子之(zhi)(zhi)间以及珠(zhu)子和细(xi)胞(bao)之(zhi)(zhi)间和互相剪(jian)切(qie)、碰撞,促使细(xi)胞(bao)壁破碎,释出(chu)内含物,在(zai)(zai)珠(zhu)波(bo)分(fen)离器的协助下,珠(zhu)子被滞(zhi)留在(zai)(zai)破碎室内,浆液(ye)流(liu)出(chu),从而实现(xian)连(lian)续操(cao)作(zuo),破碎中(zhong),生(sheng)的热量由夹套(tao)中(zhong)的冷却液(ye)带走。 
存(cun)在的问题(ti):操作参数(shu)多,一般赁经验估计并且珠子之(zhi)间的液体损(sun)失30%左右。 
3. 超(chao)声破(po)碎 
频高(gao)(gao)于超声(sheng)波在高(gao)(gao)强度(du)声(sheng)能输入下可以进行细胞(bao)破(po)碎。其破(po)碎机理(li):可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有(you)关。超声(sheng)破(po)碎的效率(lv)与声(sheng)频、声(sheng)能、处理(li)时间、细胞(bao)浓(nong)度(du)及首(shou)种(zhong)类型(xing)等因素有(you)关。 
存(cun)在问题;超(chao)(chao)声波(bo)破碎在实验(yan)室规模应(ying)用较普(pu)遍(bian),处理(li)少(shao)量(liang)样品时操作简便,液量(liang)损(sun)失少(shao),但是超(chao)(chao)声波(bo)产(chan)生的化学自由基团能(neng)使某些敏感性(xing)(xing)(xing)活性(xing)(xing)(xing)物质变(bian)性(xing)(xing)(xing)失活。而且大容量(liang)装(zhuang)置声能(neng)传递,散热均(jun)有困难(nan)。
4. 酶溶法 
就是(shi)用生物酶(mei)(mei)将(jiang)细(xi)胞壁(bi)和(he)细(xi)胞腊消化溶解的(de)方法。常用的(de)溶酶(mei)(mei)有溶菌(jun)酶(mei)(mei)β-1.3-葡聚糖酶(mei)(mei)、蛋白酶(mei)(mei)等。 
存在(zai)的(de)问题(ti);易(yi)造成产物抑制(zhi)作用(yong)(yong),这可(ke)能是导致胞内物质释(shi)放(fang)率低的(de)一个重要(yao)因素。而且溶酶价(jia)格高,限制(zhi)了大规模利(li)用(yong)(yong)。若(ruo)回收溶酶,则(ze)又增加(jia)百分离(li)纯化溶酶的(de)操作。另外酶港法通用(yong)(yong)性差,不(bu)(bu)同菌种需选择不(bu)(bu)同的(de)酶。 
5. 化学(xue)渗透法 
某些有机溶(rong)剂(如(ru)苯、甲(jia)苯)、抗生素、表(biao)面(mian)活性(xing)(xing)剂、金属螯合(he)剂、变性(xing)(xing)剂等化(hua)(hua)学(xue)药品都可以改变细胞(bao)壁或膜的通透性(xing)(xing)从而使内合(he)物有选择地渗透出来。其作(zuo)用机理;化(hua)(hua)学(xue)渗透取决于化(hua)(hua)学(xue)试剂的类型以及细胞(bao)壁和膜的结构与组成。 
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